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  • 201212-11
    抗原結(jié)合到抗體微珠基質(zhì)層析柱上

    將抗原結(jié)合到抗體微珠基質(zhì)上的zui簡(jiǎn)單方法是將微珠裝到一個(gè)層析柱內(nèi),將抗原溶液流經(jīng)層析柱,當(dāng)抗原流經(jīng)層析柱時(shí)結(jié)合到抗體上而被固定,直到洗脫時(shí)才洗脫下來(lái)。這種方法的效率是根據(jù)抗原與固定的抗體之間的接觸時(shí)間決定的,所以抗原抗體之間的作用時(shí)間可以用低流速而延長(zhǎng)。這種方法zui大一個(gè)問(wèn)題就是某些蛋白非特異性結(jié)合到分離柱上,這些蛋白可以出現(xiàn)在洗脫液中,從而使純化效率降低。基質(zhì)本身和抗體基質(zhì)復(fù)合物具有與待檢抗原溶液中蛋白質(zhì)非特異性結(jié)合的表面活性。雖然這些反應(yīng)較正常的抗原—抗體反應(yīng)要弱得多...

  • 201212-8
    淋巴細(xì)胞脈絡(luò)叢腦膜炎實(shí)驗(yàn)室診斷與結(jié)果分析

    淋巴細(xì)胞脈絡(luò)叢腦膜炎(1ymphocyticchoriomeningitis)是由淋巴細(xì)胞脈絡(luò)叢腦膜炎病毒引起的急性傳染病。臨床表現(xiàn)多樣,典型表現(xiàn)為急性無(wú)菌性腦膜炎,嚴(yán)重者可出現(xiàn)腦膜腦炎。該病一般為自限性,預(yù)后良好。[病因?qū)W]淋巴細(xì)胞脈絡(luò)叢腦膜炎病毒屬沙粒病毒屬,為RNA病毒,是zui早發(fā)現(xiàn)與人類(lèi)無(wú)菌性腦膜炎相關(guān)的病毒之一。病毒先侵入呼吸道上皮細(xì)胞繁殖,然后進(jìn)入血液循環(huán)致病毒血癥,此期可通過(guò)血腦脊液屏障而致腦膜、脈絡(luò)叢有淋巴細(xì)胞及單核細(xì)胞浸潤(rùn),腦實(shí)質(zhì)水腫等病變。[實(shí)驗(yàn)室診斷]...

  • 201212-8
    狂犬病實(shí)驗(yàn)室診斷與結(jié)果分析

    狂犬病(rabies)是狂犬病毒引起的傳染病。犬、貓、狼是狂犬病毒的主要儲(chǔ)存宿主。人被病犬(或病貓等)咬傷后,病畜唾液中的病毒經(jīng)傷口侵入人體,沿周?chē)窠?jīng)(主要是感覺(jué)神經(jīng))至背根節(jié)經(jīng)脊髓人腦而致病。[病因?qū)W]狂犬病病毒是負(fù)鏈RNA病毒,屬?gòu)棤畈《究频膹棤畈《緦佟T摬《揪幋a兩種主要蛋白,一種為G蛋白,它是病毒包膜外突起的基本單位,誘導(dǎo)產(chǎn)生中和抗體;另一種為病毒顆粒內(nèi)部的N蛋白,誘導(dǎo)補(bǔ)體結(jié)合抗體、熒光抗體等,根據(jù)狂犬病病毒N、G基因的遺傳差異,狂犬病病毒可分為6種基因型,其中1~4...

  • 201212-6
    蛋白芯片技術(shù)的基本原理與技術(shù)的研究現(xiàn)狀

    在多年的蛋白芯片技術(shù)的研究過(guò)程中,研究者為了尋找合適的物質(zhì)作為蛋白的載體進(jìn)行了不懈的探索。例如日本學(xué)者利用含有陽(yáng)離子表面活性劑(HTAB)脂質(zhì)體作為載體,通過(guò)戊二醛作用使其與一種鐵蛋白包裹外殼的成分結(jié)合組裝制備成一種納米水平的裝配體,這種裝配體可以在適當(dāng)?shù)膒H條件下使鐵蛋白分子進(jìn)入并固定于包裹外殼內(nèi)面,形成蛋白質(zhì)的載體。有人利用某些固體表面或覆蓋上含有電解質(zhì)的薄膜作為載體,可以將膠體蛋白質(zhì)顆粒成分轉(zhuǎn)移至薄膜上形成蛋白芯片。Uetz等在分析啤酒酵母基因組序列全長(zhǎng)度閱讀框架編碼各...

  • 201212-6
    蛋白芯片技術(shù)的應(yīng)用研究存在的問(wèn)題及應(yīng)用前景

    Ge在蛋白質(zhì)的相互作用的研究中,采用了一種通用的蛋白質(zhì)芯片系統(tǒng),該系統(tǒng)敏感有效,用途廣泛,可定量測(cè)定及重復(fù)使用,而且操作簡(jiǎn)易。Gavin等應(yīng)用蛋白芯片技術(shù)觀(guān)察代謝過(guò)程有關(guān)作用物和酶的相互作用關(guān)系。他們選擇3對(duì)蛋白激酶與作用物系統(tǒng),即依賴(lài)3,,5,—磷酸蛋白激酶—Kemptide;酪蛋白激酶Ⅱ—蛋白質(zhì)磷酸酶抑制因子2和p42促有絲分裂劑激活蛋白(MAP)激酶(ErK2)—ElKl,首先將各系統(tǒng)的作用物按順序固定于3張BSA-NHS玻片上,分別在有核素7-s’PATP的環(huán)境中與不...

  • 201212-4
    NDV的常規(guī)分離與鑒定新城疫

    病毒分離是診斷NDzui為確切的一種方法,并且可以為感染的毒株定性。通常采用雞胚接種的方法分離NDV,也可用鴨胚、鵪鶉胚或雞胚成纖維細(xì)胞等。病毒分離時(shí)取患病雞的腦、脾、肺等組織的勻漿混合物,加抗生素處理后,接種于雞胚或其他禽類(lèi)胚的尿囊腔或雞胚成纖維細(xì)胞中。組織樣品須反復(fù)凍融3次以上,以確保病毒分離的成功。病料接種雞胚后,一般培養(yǎng)36~96h雞胚發(fā)生死亡,可見(jiàn)胚體的頭、翅、頸、胸等處出血,尿囊液清朗,內(nèi)含大量病毒,呈現(xiàn)較高的血凝性。分離病毒時(shí)還應(yīng)結(jié)合相應(yīng)的血凝和血凝抑制試驗(yàn)等方...

  • 201212-4
    單克隆抗體技術(shù)檢測(cè)新城疫

    單克隆抗體僅僅識(shí)別一個(gè)抗原位點(diǎn),用抗病毒蛋白的單克隆抗體就可以檢測(cè)出各種病毒毒株表面抗原之間的微小差異,從而通過(guò)抗原差異來(lái)研究病毒的變異并可對(duì)其分群歸類(lèi)。20世紀(jì)80年代以來(lái),國(guó)內(nèi)外很多實(shí)驗(yàn)室已制備出多株NDV單克隆抗體,并用其測(cè)知NDV有很多變種。Russell等在1983年zui早以Ulster2C弱毒株為抗原研制出針對(duì)新城疫病毒不同多肽成分的9株單克隆抗體,將新城疫病毒的毒株分為A—H8個(gè)群,同一群中的病毒與這些單抗的反應(yīng)譜相同,大多數(shù)具有共同的生物學(xué)和流行病學(xué)特征。隨...

  • 201212-1
    檢測(cè)大腸桿菌的分子生物學(xué)方法

    傳統(tǒng)的細(xì)菌分離、培養(yǎng)及生化反應(yīng),已遠(yuǎn)遠(yuǎn)不能滿(mǎn)足對(duì)各種病原微生物的診斷以及流行病學(xué)的研究。隨著現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展,特別是免疫學(xué)、生物化學(xué)、分子生物學(xué)及計(jì)算機(jī)技術(shù)的不斷發(fā)展,新的微生物診斷技術(shù)和方法已廣泛被應(yīng)用。近來(lái)國(guó)內(nèi)外學(xué)者不斷努力,已創(chuàng)建不少快速、簡(jiǎn)便、特異、敏感、低耗且適用的微生物診斷方法,尤其是DNA探針和以PCR為代表的分子生物學(xué)技術(shù)的發(fā)展及自動(dòng)化儀器的應(yīng)用已明顯加快了微生物檢驗(yàn)的速度,明顯提高了微生物的診斷水平。近年文獻(xiàn)表明,核糖分型不能用來(lái)鑒定EHEC0157:...

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